ADN Recombinante

Ácidos nucleicos recombinantes en la naturaleza: Conjugación bacteriana en E. coli

E. coli intercambia material genético a través de puentes citoplasmáticos llamados pilis sexuales (1).

Figura 1. Proceso de conjugación bacteriana (transferencia horizontal de genes). Tomado de: https://www.researchgate.net/publication/332523550_CONJUGACION_BACTERIANA_Y_RESISTENCIA_A_ANTIBIOTICOS

ADN recombinante artificial: Insulina humana

1. T (Tema): Insulina humana recombinante para el tratamiento de diabetes mellitus tipo 2
2. O (Objetivo): Terapéutico
3. G (Gen o secuencia a clonar): INS (gen insulina), Cadena A, Cadena B
4. ER (Enzimas de restricción): EcoRI, NdeI, XbaI
5. EL (Enzima Ligasa): Ligasa del ADN
6. V (Vector): Plásmido pIBAINS (5354pb)
7. CR (Célula receptora): Procariota: E. coli 20
8. MTG (Mecanismo de transferencia o inserción del gen): Transformación por shock osmótico (por cloruro de calcio)
9. MIC (Método de identificación de clones): Cultivo, se realizaron una serie de pasos de control y purificación (DEAE Sheparose, cromatografía RP-HPLC y cromatografía Sephadex G-25) para el análisis final de la proteína de insulina humana recombinante mediante espectrometría de masas (2).

Figura 2. Proceso de producción de la insulina recombinante y esquema de construcción del plásmido. Obtenido de: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1046592818305862?via%3Dihub
Referencias bibliográficas:

1. Ordóñez L, Medina Á, Torres S, Luisa Z, Pinzón M. CONJUGACIÓN BACTERIANA Y RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS. [Internet]. ResearchGate. 2019 [1 de febrero de 2024]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/332523550_CONJUGACION_BACTERIANA_Y_RESISTENCIA_A_ANTIBIOTICOS
2. Zieliński M, Romanik-Chruścielewska A, Mikiewicz D, Łukasiewicz N, Sokołowska I, Antosik J, et al. Expression and purification of recombinant human insulin from E. coli 20 strain. Protein Expression and Purification [Internet]. Elsevier. 2019 [1 de febrero de 2024];157:63–9. Disponible en: https://reader.elsevier.com/reader/sd/pii/S1046592818305862?token=F9165B5E5E182C49B6B6754DE0436FDE3864DE62C3EE479AD3E8ECB9197016A4F2214030FB1EC12FF20301DA00EDEB0A